＜速報＞弁当を原因食品とするＡ群溶血性レンサ球菌集団食中毒事例―岐阜市

2013年６月に岐阜市内の飲食店が調製した弁当を原因食品とする食中毒疑い事例が発生し、疫学調査および病因物質検査を実施した。その結果、Ａ群溶血性レンサ球菌による集団食中毒であると判明したのでその概要を報告する。

事例概要：2013（平成25）年６月28日に岐阜県関市内の病院で開催された医療関係者の勉強会に参加し、提供された弁当を喫食した複数の参加者が体調不良を訴えたため、同病院内で簡易検査を実施したところ、溶血性レンサ球菌が検出された旨、同病院から岐阜県関保健所に連絡があった。弁当を調製したのは岐阜市内の飲食店であったため、７月１日、岐阜県関保健所から岐阜市保健所に通報があり、調査を開始した。

調査の結果、６月26～30日に当該飲食店が調製した弁当を喫食したり、当該飲食店で食事をした８グループ190名のうち143名が有症者だった（発症率75.3％）。主な症状は、のどの痛み、発熱（平均38.5℃）、倦怠感で、潜伏時間は、4.5～74時間（平均28.7時間）だった。有症者および調理従事者の咽頭ぬぐい検査を実施したところ、検査を行った４グループの有症者24名中16名、調理従事者５名中１名からＡ群溶血性レンサ球菌が検出された。岐阜市保健所は、７月２日、当該飲食店が提供した弁当を原因とする食中毒と判断し、当該飲食店を５日間（平成25年７月２日～７月６日）の営業停止処分とした。

検査結果：有症者の咽頭ぬぐい液10検体、調理従事者の咽頭ぬぐい液5検体、調理従事者の手指のふきとり１検体、調理場のふきとり４検体、食品残品８検体を対象に、Ａ群溶血性レンサ球菌について検査を実施した。検体を血液寒天培地に直接塗抹し37℃、５%CO₂下にて、24～48時間培養した。血液寒天培地上でβ溶血環を示したコロニーについて、グラム染色、カタラーゼ試験を実施し、BHI brothでの液体培養所見を確認した。さらにアピストレップ20（biomerieux）にて、菌種の同定を行った。その結果、調理従事者５検体中１検体、有症者の咽頭ぬぐい液10検体中６検体からStreptococcus pyogenesが検出された。調理場および手指のふき取り５検体、食品残品８検体からS. pyogenesは検出されなかった。

岐阜市分離株７株（うち調理従事者由来１株、有症者由来６株）および岐阜県分離株10株（すべて有症者由来株）について群の決定、Ｔ型別、およびパルスフィールド・ゲル電気泳動（PFGE）による解析を行った。連鎖球菌キットストレプトLA「生研」（デンカ生研）で群分けを行ったところ、すべてＡ群であった。Ｔ型は、Ｔ型別用免疫血清（デンカ生研）を使用して型別し、すべてTB3264型であった。PFGEによる解析の結果、制限酵素Sma I およびSfi I によるPFGEパターン（図１）がそれぞれ一致し、同一由来株であることが考えられた。

考察：今回、有症者が複数の医療関係者であったため、溶血性レンサ球菌の簡易検査が速やかに行われ、溶血性レンサ球菌による集団食中毒と判明したが、通常消化器系以外の症状の場合は食中毒であることは見過ごされる可能性がある。本事例は原因菌が最初に判明していたため、速やかに調査および検査を実施することができた。

調理従事者から分離されたS. pyogenes と有症者から分離されたS. pyogenes はＴ型別、PFGEの解析結果により同一と考えられる。食中毒防止のため、調理従事者の健康管理および食品の衛生的な取り扱いが重要である。

最後に検査法について助言していただきました岐阜県保健環境研究所の関係各位に深謝します。

＜速報＞ノロウイルスによる食中毒事例―愛媛県

2013年５月に愛媛県内の飲食店においてノロウイルス（NoV）GIIによる食中毒事例が発生したので、その概要を報告する。

５月27日、医療機関から「下痢、嘔吐、発熱等を呈する患者５名を診察した」と八幡浜保健所に連絡があった。同保健所で感染症および食中毒の両面から調査したところ、管内のビジネスホテル内飲食店で会食した７グループ132人のうち５グループ63人、同飲食店が調理した弁当を喫食した１グループ46人のうち25人および同ホテル宿泊客44人のうち22人が、25日から下痢、嘔吐、発熱等の食中毒様症状を呈し、うち58人が医療機関を受診し、１人が入院した。潜伏時間は17.5～118時間で、36～48時間をピークとする患者発生パターンを示した。当所に搬入された、患者糞便19件、調理従事者等糞便21件について、リアルタイムPCR法によるNoVの遺伝子検出を実施した結果、患者糞便16件（84.2％）、調理従事者等糞便８件（38.1％）からNoV GIIが検出された。

今回の事例では、患者に共通する食事は当該飲食店が提供した食事のみであること、患者および調理従事者の糞便からNoVが検出され、患者の症状、潜伏時間等の疫学調査結果と同ウイルスによる食中毒の特徴が一致することから、本事例を同飲食店が提供した食事を介して発生したNoVによる食中毒と断定した。

NoVが検出された患者および調理従事者等の検体について、カプシドN/S領域を増幅するプライマーを用いてPCR増幅後、ダイレクトシークエンス法により塩基配列を決定し、系統樹解析を実施した。その結果、実施した検体はすべてNoV GII/4に型別され、塩基配列は100％一致していた（図1）。さらに、ポリメラーゼ（Pol） 領域からカプシドN/S領域およびカプシドP1/P2領域を増幅し遺伝子解析を行った結果（図2、図3）、用いた株は、すべて既知のGII/4変異株とは異なる新しいクラスターに分類され、Pol領域（699bp）、カプシドP1/P2領域（624bp）とも100％一致し、Sydney/NSW0514/2012/AU（JX459908）とPol領域で98.9％、カプシドN/S領域で100％、カプシドP1/P2領域で98.1％の高い相同性を示した。また、これらの株は、Pol領域ではOsaka1/2007/JP 2007aに最も近縁（相同性94.3％）であり、カプシド領域ではApeldoorn317/2007/NL 2008aに最も近縁（相同性N/S領域97.2％、P1/P2領域94.2％）であったことから、Pol領域とカプシド領域の間で遺伝子組換えを起こしたウイルスであると考えられた。2012年10月以降に県内で検出されたGII/4の新しい変異株と本事例から検出されたGII/4株は極めて近縁（相同性98.4～100％）であった。

今回、消化器症状がみられない調理従事者からノロウイルスが検出されたことから、不顕性感染者の存在にも留意が必要であることを改めて認識した。